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其他方法试剂盒
- 磷脂酰肌醇3磷酸(PIP3)ELISA试剂盒-竞争法检测
- 上海尊龙凯时生物从事酶联免疫学10年有余，技术成熟，产品稳定。尊龙凯时品牌自主研发ELISA试剂盒，现已涵盖20多个种属，数千种产品，涉及肿瘤、激素、自身免疫、心血管、代谢等十多个研究领域。其ELISA试剂盒不仅检测指标丰富，还可以根据实验需求定制检测范围，并且给予实验外包与免费代测服务。欢迎您来电咨询。
磷脂酰肌醇3磷酸(PIP3)ELISA试剂盒
货号：HB158-SH
规格：96T
价格：￥2500
本试剂盒仅供研究使用。
使用目的：
本试剂盒用于测定样本中磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）的含量。
实验原理
本试剂盒应用酶联免疫竞争法测定标本中磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）水平。用纯化的磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P），和HRP标记的磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）抗原，使它们竞争结合，，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。样本颜色的深浅和样品中的磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）的含量呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），顺利获得标准曲线计算样品中磷脂酰肌醇3磷酸（PI3P）的含量。
试剂盒组成
|
1 |
30倍浓缩洗涤液 |
20ml×1瓶 |
8 |
标准品S1（800 ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
|
2 |
酶标试剂 |
6ml×1瓶 |
标准品S2（400 ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
|
|
3 |
酶标包被板 |
12孔×8条 |
标准品S3（200 ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
|
|
4 |
显色剂A液 |
6ml×1瓶 |
标准品S4（100ng/L ） |
0.5ml×1瓶 |
|
|
5 |
显色剂B液 |
6ml×1瓶 |
标准品S5（50ng/L） |
0.5ml×1瓶 |
|
|
6 |
终止液 |
6ml×1/瓶 |
9 |
说明书 |
1份 |
|
7 |
样品稀释液 |
6ml×1/瓶 |
10 |
封板膜 |
2张 |
标本要求
1．标本处理：（1）水样 采集后经 -20℃反复冻融三次，再经玻璃纤维过滤后，备查
（2）组织 样品用丁醇：甲醇：水(5：25：70 V：V：V)抽提，或按相关文献提取进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，备查
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 加样：分别设标准孔、空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上标准孔中加50微升，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
7. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
8. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
详细说明书请咨询业务员！
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